設為首頁 | 加入收藏
              技術文章首頁 > 技術文章 使用lip3000脂質體3000試劑,您可以獲得以下五點
              • 使用lip3000脂質體3000試劑,您可以獲得以下五點
              • 點擊次數:6395 更新時間:2019-12-26
              • 0
              •    lip3000脂質體3000是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中,脂質體疏水尾部伸向空氣,攪動后形成雙層脂分子的球形脂質體,直徑25~1000nm不等。脂質體可用于轉基因,或制備的藥物,利用脂質體可以和細胞膜融合的特點,將藥物送入細胞內部生物學定義:當兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時,分子的疏水尾部傾向于聚集在一起,避開水相,而親水頭部暴露在水相,形成具有雙分子層結構的的封閉囊泡,稱為脂質體。藥劑學定義脂質體(liposome):系指將藥物包封于類脂質雙分子層內而形成的微型泡囊體。
                 
                  使用試劑,您可以獲得:
                  1、在多種細胞系中具有*地轉染效率和較高水平地重組蛋白表達。
                  2、傳輸siRNA的優異性能。
                  3、在有血清存在的情況下可保證轉染效力——轉染后無需更換培養基。
                  4、保證可以用于高通量應用的試劑。
                  5、用于建立穩定細胞系的可靠試劑lip3000脂質體3000試劑為大多數細胞提供了zui高的轉染效率和活性。當存在血清或用于進行蛋白表達的細胞系(如COS-7,CHO和293)時,lip3000脂質體3000尤為有效,效率可超過90%。
                 
                  注意事項:
                  要求細胞鋪板密度較高,以90%-95%為佳,這有助于減少陽離子脂質體細胞毒性造成的影響??捎糜谟醒迮囵B基的轉染,并且轉染前后不需要換培養基,使得操作方便了許多,但是要注意制備轉染復合物時要求用無血清培養基稀釋DNA和轉染試劑,因為血清會影響復合物的形成。
                  復合物形成后是可以加入血清。這里要特別注意檢測所用的無血清培養基是否能和lip3000脂質體3000匹配,比如已知CD293,SFMII,VP-SFM就不行。此外還應該留意,如果研究的基因要求比較長的表達時間,比如細胞周期相關基因,或者時細胞表面蛋白,選擇細胞鋪板密較低的轉染試劑,不適合用lip3000脂質體3000。
                  對于大多數陽離子脂質體試劑,應優化DNA濃度和陽離子脂質體試劑量以得到zui大的轉染效率。DNA和轉染試劑的比例,通常推薦是1:2或者1:3,優化可以從0.5-5之間慢慢試。使用小劑量確定的優化條件可以用于進行大劑量的轉染,只要根據培養板表面比例線性增加鋪板細胞的數目、陽離子脂質體試劑和DNA量就可以了。
                  還有轉染的時候培養基中不能添加抗生素。抗生素,比如青霉素和鏈霉素,一般對于真核細胞無毒,但陽離子脂質體試劑增加了細胞的通透性,使抗生素可以進入細胞。這降低了細胞的活性,導致轉染效率低。所以,在轉染培養基中不能使用抗生素,甚至在準備轉染前進行細胞鋪板時也要避免使用抗生素。這樣,在轉染前就不必潤洗細胞。對于穩定轉染,不要在選擇性培養基中使用青霉素和鏈霉素,因為這些抗生素是GENETICIN選擇性抗生素的競爭性抑制劑。另外,為了保證無血清培養基中細胞的健康生長,使用比含血清培養基更少的抗生素量。
                  陽離子脂質體應該在4度保存,要注意避免多次反復長時間開蓋,因為可能會導致脂質體氧化而影響轉染效率。當然還有要注意質粒的質量,質粒的內毒素是轉染的大敵。
              • 上一篇:以下敘述Sigma液體培養基的三種配方你都知道嗎?
              • 下一篇:分析lip3000脂質體3000的分類及特點
              移動電話
              400-998-5068
              點擊這里給我發消息

              化工儀器網

              推薦收藏該企業網站
              浪潮AV色综合久久天堂| 一级做a爰片久久毛片人呢| 久久青青草原亚洲av无码app| 亚洲国产综合久久天堂| 久久国产V一级毛多内射| 久久国产乱子伦精品免费午夜| 亚洲欧美精品一区久久中文字幕| 精品国产日韩久久亚洲| 久久精品99久久香蕉国产色戒 | 94久久国产乱子伦精品免费| 久久福利青草精品资源站免费| 99久久国产主播综合精品| 亚洲人成无码网站久久99热国产| 久久精品无码一区二区WWW| 色综合久久天天综合| 综合久久一区二区三区| 国产精品久久成人影院| 一本久久综合亚洲鲁鲁五月天| 久久丫精品国产亚洲av不卡| 久久久久国产视频电影| 99久久婷婷免费国产综合精品| 亚洲精品无码久久毛片| 久久久久国产精品| 久久人妻少妇嫩草AV无码专区 | 久久99精品国产99久久| 亚洲v国产v天堂a无码久久| 久久久久久综合一区中文字幕| 7777久久久国产精品消防器材| 精品99久久aaa一级毛片| 69久久夜色精品国产69| 欧美喷潮久久久XXXXx| 久久成人小视频| 国产一区二区精品久久岳| 久久AV高清无码| 欧美大香线蕉线伊人久久| 久久综合88熟人妻| 久久丫忘忧草产品| 亚洲精品成人久久久| 亚洲国产精品成人AV无码久久综合影院 | 久久人人妻人人爽人人爽| 久久久久久久99精品免费观看|